Principe : réaction d'hémagglutination indirecte.

             La  souche Nichols de la bactérie tréponéma pallidum est pathogène, la souche Reiter est non pathogène.
              Les anticorps dirigés contre les antigènes glyco-protéiques de la souche Nichols forment un réseau
              d'hémagglutination avec des hématies de poussins sensibilisées par les antigènes de la soucheNichols.

              Afin d'éliminer les anticorps dirigés contre des Ag de la souche non pathogène ( REITER ),
              le tampon de dilution contient une suspension soluble d' ag de la souche REITER.
              Cela permet d'éviter des interférences avec des Ag communs aux 2 souches.

 Témoins recommandés :

             Témoin sérum : 25 µl de sérum dilué au 1 / 20  +   75 µl d'hématies non sensibilisées.
                                      On doit observer une sédimentation des hématies au fond de la cupule.

           Témoin HS :  25 µl de tampon  + 75 µl d'hématies sensibilisées.
                                    On doit observer une sédimentation des hématies au fond de la cupule.

             Témoin HNS :  25 µl de tampon  + 75 µl d'hématies non sensibilisées.
                                    On doit observer une sédimentation des hématies au fond de la cupule.

Mode opératoire pour le test quantitatif :

Diluer le sérum à analyser au 1 / 20  avec le tampon fourni ( le tampon est coloré en jaune ) .
20 µl sérum + 380 µl de tampon.

Après introduction des hématies dans les cupules, laisser 45 minutes à température ambiante à l'abri des vibrations.

Lecture :

Rechercher la cupule qui donne encore une hémagglutination nette avec un fond assez opaque.
Attention les manipulations des microplaques de façon excessive peuvent décomposer les hémagglutinations formées.

                      *  :   reporter 25 µl dans la cupule suivante à gauche.
                    ** :   jeter 25 µl dans l'eau de javel.

        Consulter également les liens suivants sur ce même site bts ab  Jolimont :

        Syphilis test VDRL
        Syphilis test par IFI ( immunofluorescence indirecte )
       Courbe de production d' Anticorps selon les différents stades de la syphilis.
        Les différents stades de la Syphilis I , II ,  III .